海外医讯 | CRISPR编辑的免疫细胞输入癌症患者后可以存活并发挥功能

该图显示了在试验中测试的细胞的遗传变化

图片来源：宾夕法尼亚大学

根据宾夕法尼亚大学艾布拉姆森癌症中心研究人员发布的最新数据，经过基因编辑的免疫细胞可以在癌症患者接受免疫后的几个月内持续存在并发挥功能。

研究小组表明，从患者体内取出的细胞并经过实验室编辑可以在早期或者输注几个月后杀死癌症。对这些细胞的进一步分析证实，它们已通过三种特定方式成功进行了编辑，这标志着人类基因组的多次编辑首次获得批准用于研究用途的，这是继美国首个测试人类基因编辑方法的临床试验，也是《科学》杂志上发表的继去年的最初报告之后的新数据。研究人员能够使用CRISPR/ Cas9技术成功编辑了三位癌症患者的免疫细胞，目前宾夕法尼亚大学正在与帕克癌症免疫治疗研究所合作进行这项研究。

宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的艾布拉姆森癌症中心及帕克癌症免疫治疗研究所所长介绍，“我们从这项临床试验的三名患者那里获得的数据证明了两个重要的事情，这是前所未有的。首先，我们可以在这个过程中成功的进行精确的多次编辑，从而使细胞存活更长的时间。其次，到目前为止，这些细胞已显示出持续的攻击和杀死肿瘤的能力。”

这些发现是宾大在细胞和基因治疗先驱者历史上的最新里程碑，包括开发了首个FDA批准的针对儿童和成人血液癌患者的CART细胞疗法Kymriah。

这项研究与CAR-T细胞疗法密切相关，在CAR-T细胞疗法中，患者的免疫细胞被设计用来对抗癌症。但是这项研究具有一些关键差异，研究人员从收集血液中的T细胞开始，然而没有使用针对蛋白质的受体(例如CD19)武装这些细胞，而是首先使用CRISPR/Cas9编辑来去除三个基因。前两个编辑删除了T细胞的天然受体，因此可以对其进行重新编程以表达合成的T细胞受体，从而使这些细胞能够寻找并消灭肿瘤。第三次编辑删除了PD-1，这是一个自然的检查点，有时会阻止T细胞执行工作。

对三名患者的新分析已经证实，所制造的细胞包含所有三种编辑，为这种方法提供了概念证明。这是首次证实了CRISPR/ Cas9技术能够同时靶向人类多个基因的能力，并说明了这项技术可以治疗许多以前无法治愈的疾病。

一旦敲除了这三个基因，就可以插入癌症特异性的合成T细胞受体来完成第四次基因修饰，告诉编辑的T细胞靶向一种称为NY-ESO-1的抗原。

先前发表的数据显示，这些细胞通常存活不到一周，但这项新分析显示，该研究中使用的编辑后的细胞持续存在，最长随访时间为9个月。输液后几个月，研究人员抽取了更多的血液，并分离了CRISPR编辑的细胞进行研究。在实验室，这些细胞仍然能够杀死肿瘤。

June说：“以前的研究表明这些细胞在几天之内就会失去功能，而这项研究中的CRISPR编辑细胞在单次输注后可以在更长的时间内保留抗肿瘤功能，这一事实令人兴奋。”

这项研究中使用CRISPR编辑的T细胞像CART细胞一样没有活性，他们需要一种称为HLA-A*02：01的分子的协同作用，这种分子仅在部分患者中表达。这意味着必须提前筛查患者，以确保他们适合该方法。满足要求的参与者在等待细胞培养的同时，还根据需要接受其他临床指示的治疗。一旦完成该过程，所有三名患者在短暂的化疗后一次输注接受了基因编辑的细胞。血液样本分析显示，所有三名参与者均在患者体内经CRISPR编辑的T细胞生根并生长。

CRISPR技术以前尚未在人类中进行过测试，在过去的十年中，宾大的研究人员开创了许多“首次使用”工程T细胞的先河。即使有这样的经验，在确保适当的患者安全措施的同时将这项工作转移到诊所也意味着研究团队必须通过一系列全面而严格的机构和法规批准步骤，包括获得美国国立卫生研究院重组DNA研究咨询委员会的批准，以及美国食品药物管理局，宾夕法尼亚大学的机构审查委员会和机构生物安全委员会进行审查，整个过程需要两年以上。